Storitve sinteze peptidov po meri

 

Biorunstar je podjetje za-polne storitve peptidov. Za pripravo peptidnega izdelka po meri uporabljamo sintezo peptidov v trdni-fazi, sintezo-faze v raztopini in mikrovalovno sintezo. Želeni vrh očistimo s preparativno HPLC, končni vzorec peptida pa ponovno analiziramo z reverzno-fazno HPLC, da preverimo čistost. Za potrditev mase peptida se uporablja masna spektrometrija, za preverjanje posebnih majhnih sestavljenih-peptidnih kompleksov pa so na voljo poročila o analizi HNMR.

 

Pregled obsega storitev sinteze peptidov

Dolžina zaporedja od 2 do 120 aminokislin
Količine peptidov od mg -kg
Different levels of purity, crude, desalt, >70, >80, > 90, >95% and >98%
Ciklični peptidi - Cys do Cys, od glave do repa, notranji laktam
Enostavne in kompleksne modifikacije peptidov
Mesečna dobavljena zmogljivost preko 1000 peptidov
Alikvoti ustreznih velikosti po želji stranke

 

Večino peptidov po meri, naročenih pri Biorunstarju, je mogoče dostaviti v 2-3 tednih. Čas priprave se na splošno razlikuje glede na dolžino, količino in kompleksnost peptida. Vsak peptid je opremljen s strogimi analitičnimi specifikacijami, ki vključujejo HPLC kromatograme za zagotovitev čistosti in masno spektralno analizo za potrditev identitete

 

Sinteza peptida, spremenjena na koncu C

C-konec	Prikaži strukturo	C-konec	Prikaži strukturo
Amidacija		CMK/FMKkloro(fluoro)-metilketoni
Aldehid		Ester (OMe/OEt)
Alkoholi		hidrazid
Cisteamid (merkaptoacetamid)		OSU
AMC 7-amino-4-metilkumarinil		pNA (p-nitroanilid)
AFC 7-amino-4-(trifluorometil)-2-benzopiron

 

Sinteza peptidov spremenjena pri Nterminal

N{0}}konec	Prikaz strukture	N{0}}konec	Prikaz strukture
Acetilacija		3-indolilocetna kislina
Benzoil (Bz)		MpaInAA (3-merkaptopropil)
CBZ (benziloksikarbonilacija)		sukcinilacija
Bromoacetil (Br-Ac)		MCA6-maleimidoheksanojska kislina
Formilacija		Tioester
Hidroksamska kislina

 

Amidacija peptidov in acetilacija peptidov

Če peptid izvira iz notranjega proteinskega zaporedja, bi bili v proteinu konci peptidnega fragmenta amidi (CONH2), tako da amidiranje C-konca in acetiliranje N-konca posnema to naravno stanje. Te modifikacije odpravijo naboj peptida in ga zaščitijo pred encimsko razgradnjo.

 

Amidacija peptidov.	Acetilacija peptidov

 

Aldehidni peptid:peptidni aldehidi imajo inhibicijske lastnosti proti različnim encimom. Poleg tega so peptidni aldehidi zelo zanimivi za modifikacijo peptidnega ogrodja ali ligacijske reakcije.

 

CMK/FMK označen peptid:Peptidni klorometilketoni (CMK) so zelo močni in ireverzibilni zaviralci serinskih proteaz. Razpoložljivost je odvisna od zaporedja peptidov.

 

Ester (OMe/OEt) : Za razmerja med -strukturo in aktivnostjo (SAR), odstranitev naboja, predzdravilo.

 

p-Nitro-Anilin: kromogen, ki se uporablja kot kolorimetrični encimski substrat v številnih standardnih encimskih testih v kivetah. Največja vzbujanje je 410 nm.

 

Formilirani peptid:Družina formil peptidnih receptorjev (Fpr) je dobro znana po svojem prispevku k imunski obrambi pred patogeni v levkocitih ljudi in glodalcev.

 

holesterol konjugiranpeptid:spojine,-konjugirane s holesterolom, so učinkoviti zaviralci infektivnosti in zlitja membran. Holesterol se lahko konjugira na peptid preko N- ali C-terminalnega cisteina.

Cholesterol konjugiranna peptidnem C-koncu:

 

Peptidi, konjugirani z maščobnimi kislinami:Peptidi, konjugirani z maščobnimi kislinami, se lahko uporabljajo za protibakterijsko delovanje ali toksičnost za evkariontske celice itd. maščobne kisline, kot so kaprilna kislina (C8), kaprinska kislina (C10), lavrinska kislina (C12), miristinska kislina (C14), palmitinska kislina (C16) ali stearinska kislina (C18) itd., ki so na splošno konjugirane na peptidnem N-koncu ali na C-terminalu preko stranske verige lizina.

 

Linkerji, distančniki, ki se uporabljajo pri sintezi peptidov

Odvisno od zasnove in uporabe lahko vstavimo distančnik/povezovalnik med oznake, protein (KLH,BSA) biotin ali fluorescenco in peptide. Pogost hidrofobni distančnik je aminoheksanojska kislina (Ahx), pogost hidrofilni distančnik pa je poli(etilen) glikol (PEG).Drugi si oglejte spodnjo tabelo: kot so Gly, AEA, Ava, ANP Linker, beta-alanin, C12, GABA itd.

 

Ime	Dolžina (število obveznic)	Struktura
(2-aminoetoksi)ocetna kislina (AEA)	6
4-aminomaslena kislina (GABA)	5
5-aminovalerijanska kislina (Ava)	6
Aminoheksanojska kislina (Ahx)	7
12-amino-dodekanojska kislina(c12)	13
3-amino-3-(2-nitrofenil)prepanojska kislina (ANP Linker)
Beta{0}}alanin	4
Mini-PEG	9
PEG

 

 

Kakšna oblika soli bi bila prednostna za peptid po meri?

 

Peptidi po meri, ki jih sintetizira SPPS, so privzeto dostavljeni kot soli trifluoroocetne kisline (TFA). To je zato, ker se TFA uporablja med cepitvijo peptida s trdne nosilne smole in odstranjevanjem zaščite stranskih verig aminokislin. Poleg tega se TFA običajno uporablja kot komponenta puferskega sistema za HPLC čiščenje peptidov. Vsebnost TFA se običajno giblje od 10 % do 45 %, odvisno od števila ostankov Arg, Lys in His v zaporedju.

 

V nekaterih celičnih testih, študijah na živalih in predkliničnih raziskovalnih primerih lahko ostanki TFA potencialno povzročijo neuspeh poskusov. Raziskovalci se lahko odločijo, da odstranijo TFA ali jo pretvorijo v acetatne ali hidrokloridne soli. Zaradi dodatnega postopka odstranjevanja TFA se bodo stroški povečali za približno 20 %. Biorunstar lahko zagotovi odstranitev TFA (s TFA<1% guarantee) and TFA convert it to acetate or HCl salts services ( with TFA<0.1% guarantee) .